Etude de l’activité antioxydante des fractions lipidiques et phénoliques des feuilles et des graines de Lawsonia inermis d’Algérie

Abstract

تم في هذه الدراسة استخلاص المركبات الليبيدية باستعمال الهكسان والكلوروفورم/ميثانول (1.2: V/V)، ودراسة خصائصها الفيزيائبة والكيميائية، وتحليل تركيب الأحماض الدهنية المكونة لها، وكذلك استخلاص وتقدير المركبات الفينولية الكلية (الفلافونيدات والتانينات) من أوراق وبذور نبات الحناء Lawsonia alba من ثلاثة مناطق من الجنوب الجزائري أدرار، بسكرة وورقلة. أظهرت النتائج أن مردود استخلاص المركبات الليبيدية متوسط ومتقارب بالنسبة لكلا المذيبين الهكسان وكلوروفورم/ميثانول، ويتراوح ما بين 7,52 و 10,45%. كما أظهرت نتائج تحليل أقسام الدهون الكلية أن هذه الليبيدات تتكون من نسبة كبيرة من الليبيدات المتعادلة (الغليسريدات) 85,82) (93.08% -، ونسبة صغيرة من الليبيدات القطبية (الغليكوليبيدات والفوسفوليبيدات) (13.85% - 3.90). كذلك تبين من خلال نتائج تحليل الأحماض الدهنية أن نسبة الأحماض الدهنية غير المشبعة الكلية (85,58% - 66,02) كانت أعلى من نسبة الأحماض الدهنية المشبعة (32,97% - 14,38). ودلت نتائج تقدير المركبات الفينولية الكلية والفلافونيدات والتانينات المكثفة أن الأوراق والبذور تحتوي على كميات هامة من هذه المركبات خاصة البذور حيث بلغت نسبة المركبات الفينولية الكلية88,31mg GAE/g DW . كما قدرت الفعالية المضادة للأكسدة للمستخلصات الليبيدية والفينولية كمضادات أكسدة طبيعية باستعمال اختبار DPPH، اختبار FRAP واختبار PPM، حيث بينت النتائج أن لهذه المستخلصات قدرة عالية في تثبيط الجذور الحرة حيث بلغت أقل قيمة IC50 إلى 0,007g/l أفضل من IC50 لمضادات الأكسدة المستعملة في الصناعة، كما أظهرت نتائج تقدير القدرة الإرجاعية لمختلف المستخلصات بطريقة FRAP وPPM، أن لهذه المستخلصات القدرة على الإرجاع. وأظهـرت نتائج الفعاليـة المضـادة للبكتيريا أن كل المستخلصات لها فعاليـة تثبيطيـة تجاه البكتيريا Staphylococcus aureus إلا المستخلص الليبيدي لبذور أدرار وورقلة، حيث بلغ أعلى قطر منطقة التثبيط إلى25,23mm عند التركيز 200 mg/ml، في حين لم تظهر بعض المستخلصات أي تأثير تثبيط ضد البكتيريا Escherichia coli وPseudomonas aeruginosa وفي جميع التراكيز المستخدمة، والبعض الآخر أبدى فعالية متوسطة إذ لم يتجاوز أعلى قطر منطقة التثبيط15,44mm ضد البكتيريا Pseudomonas aeruginosa و16,61mm تجاه البكتيريا Escherichia coli عند التركيز 200 mg/ml. أما نتائج اختبار السمية الخلوية لكريات الدم الحمراء (RBC) لدم الإنسان ولكل المستخلصات وبسلسلة من التراكيز فقد بينت عدم وجود أي سمية خلوية للمستخلصات إذ لم يظهر أي تحلل لكريات الدم الحمراء.

In this study, it is realized the extraction of lipidic compounds using the solvents hexane and chloroform/methanol (2:1, V /V), the study of physicochemical properties of lipids, the chemical composition of the fatty acids constituent, the extraction and estimation of total phenolic compounds (flavonoids and tannins) of the leaves and the seeds of the henna plant Lawsonia alba from three regions of southern Algeria: Adrar, Biskra and Ouargla. The results showed that the extraction yield of lipidic compounds was medium and close for the solvents hexane and chloroform/methanol, ranging from 7.52 and 10.45%. Also the results of the analysis of the total lipid classes showed that these lipids consist of a large proportion of neutral lipids (NLs) (triacylglycerols) (85.82 - 93.08% ) and a small proportion of the polar lipids (glycolipids (GLs) and phospholipids (PLs)) (3.90 - 13.85%). As well as it is appeared through the results of the analysis of fatty acids that the percentage of the total unsaturated fatty acids (66,02 - 85,58%) was higher than the percentage of saturated fatty acids (14,38 - 32,97%). And also the results of estimating the total phenolic, flavonoids and condensed tannins compounds showed that the leaves and the seeds contain important amounts of these compounds, especially the seeds with the highest percentage 88,31 mg GAE/g DW of total phenolic. The antioxidant activity of lipidic and phenolic extracts is also estimated as natural antioxidants using DPPH, FRAP and PPM tests. The results showed that these extracts have a high potential in the inhibition of free radicals, reaching the lowest value IC50 to 0,007g/l better than IC50 of antioxidants used in industry. The results of estimating the reduction capacity of the different extracts with FRAP and PPM tests, showed that these extracts have a reduction power. The results of the antibacterial activity showed that all the extracts have an inhibition activity toward the bacteria Staphylococcus aureus except seeds lipidic extract of Adrar and Ouargla, where the highest diameter of inhibition zone reached 25,23mm at the concentration 200mg/ml, while some extracts did not show any inhibition against the bacteria Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa in all concentrations used. Others extracts showed medium activity since the higher diameter of the inhibition zone did not exceed 15,44mm against the bacteria Pseudomonas aeruginosa and 16,61 mm toward the bacteria Escherichia coli at the concentration 200 mg/ml. The results of the cellular toxicity of red blood cells test (RBC) of human blood have shown that there are no cellular toxicity for all extracts and with the series of concentrations since no degradation of red blood cells is appeared.

Dans cette étude, les lipides ont été extraites en utilisant l’hexane et le chloroforme/méthanol (1 :2, V/V) et l’étude de leurs propriétés physico-chimiques, l’analyse de la composition des acides gras, ainsi que l’extraction et l’évaluation des phénols totaux (flavonoïdes et tannins) des feuilles et des graines de Lawsonia alba des trois régions du sud d’Algérie: Adrar, Biskra et Ouargla. Les résultats montrent que les rendements d’extraction des lipides par les deux solvants (hexane et chloroforme/méthanol) moyens et proches; ils sont respectivement entre 7.52 et 10.45 %. Les résultats d’analyse des classes des lipides totaux montrent la prédominance des lipides neutres (glycérides: 85.82-93.08 %) et un faible teneur des lipides polaires (glycolipides et phospholipides: 3.90-13.85%). L’analyse des acides gras montre aussi que le teneur en acides gras insaturés totaux (66,02 - 85,58%) est supérieur à celle des acides gras saturés (14,38 - 32,97%). Les résultats de l’estimation des composés phénoliques totaux, des flavonoïdes et des tannins condensés montrent que les graines et les feuilles contiennent des teneurs importantes de ces composés particulièrement les graines, le teneur des composés phénoliques totaux est 88,31mg GAE/g DW. L’évaluation de l’activité antioxydante des extraits lipidiques et phénoliques comme antioxydant naturels a été estimé en utilisant le test de DPPH, le test FRAP et le test PPM. Les résultats de ces tests montrent que les extraits présentent une capacité d’inhibition élevée des radicaux libres, la valeur la plus faible de l’IC50 est de 0.007 g/l, cette valeur est mieux que l’IC50 des antioxydants industriels, les résultats de l’évaluation de la capacité de réduction des différents extraits a montré que ces extraits ont un pouvoir réducteur par la méthode FRAP et PPM. Les résultats de l’activité antibactérienne montrent que tous les extraits ont une activité d’inhibition vis-à-vis de Staphylococcus aureus sauf l’extrait lipidique des graines d’Adrar et Ouargla, le diamètre maximal de la zone d’inhibition atteint de 25.23 mm à une concentration de 200 mg/ml, pourtant certains extraits ne montrent aucune inhibition pour l’Escherichia coli et Pseudomonas aeruginosa pour toutes les concentrations utilisées, d’autres présentent une activité moyenne car elle ne dépasse pas le diamètre maximal 15.44 mm pour Pseudomonas aeruginosa et 16.16 mm pour Escherichia coli à une concentration de 200 mg/ml. Les résultats de test de cytotoxicité des globules rouges (RBC) humains et pour tous les extraits avec une série de concentrations ne montrent aucune cytotoxicité et hémolyse observée