Etude de l’activité de Tyrosine Ammoniac Lyase (TAL) extrait à partir de quelques plantes aromatiques du Sahara Algérien

Abstract

Notre objectif est de valoriser quelques plantes aromatiques du Sahara algérien, Petroselinum crispum (Apiaceae), Mentha piperita (Lamiaceae), Medicago sativa (Fabaceae) et Deverra scoparia (Apiaceae), par l’extraction et l'évaluation de l'activité de l’enzyme tyrosine ammoniac lyase (TAL). Pour étudier l’enzyme TAL nous avons testé son activité avec son substrat, ce test a montré des résultats positifs quand à la présence de l'enzyme TAL dans les extraits de sorte qu’elle désamine la L-tyrosine pour donner de l'acide p coumarique mesuré quantitativement par spectrophotomètre. Les extraits bruts ont été purifiés par les ions MnSO4, La concentration des protéines présentes dans les extraits avant et après purification, a été mesuré par la méthode de Bradford, les concentrations obtenues dans les extraits bruts sont les plus élevées. Un test enzymatique a été réalisé sur les extraits bruts et purs dont l’activité de l’enzyme TAL purifié a été maximale : 0,45% pour Medicago sativa. Le pH et la température ont été mesuré par la variation de milieu réactionnel a différentes températures et pH, les résultats obtenus ont révélé que TAL est une enzyme alcaline (PH optimal 8,2) et thermorésistante (l’enzyme reste active à 40°C). La réaction enzymatique a été testée, en présence des ions métalliques, les résultats ont révélé que les ions FeCl3 comme cofacteur de TAL. La réaction a été testée également avec les huiles essentielles de Deverra scoparia et Salvia chudaei et l’activité a été augmentée par ces HE, ces derniers sont alors des puissants activateurs de TAL. L’activité de TAL a été mesurée à différentes concentration de tyrosine et les résultats obtenus ont été mentionné sous forme des courbes sigmoïde qui montrent une activité allostérique de l’enzyme avec une structure oligomérique. Le dosage de l’activité enzymatique de differents extraits a donné des valeurs variables à savoir la concentration d’activité catalytique (CAC), l’activité spésifique (AS), l’activité totale, l’enrichissement et le rendement

Our objective is to promote some aromatic plants from the Algerian Sahara, Petroselinum crispum (Apiaceae), Mentha piperita (Lamiaceae), Medicago sativa (Fabaceae) and Deverra scoparia (Apiaceae), by extracting and evaluating the activity of the plant enzyme tyrosine ammonia lyase ( TAL). To study the enzyme TAL we tested its activity with its substrate, this test showed positive results when the presence of the enzyme TAL in the extracts so that it dimes L-tyrosine to give acid p coumaric measured quantitatively by spectrophotometer. The crude extracts were purified by MnSO4 ions. The concentration of the proteins present in the extracts before and after purification was measured by the Bradford method; the concentrations obtained in the crude extracts are the highest. An enzymatic test was carried out on crude and pure extracts whose activity of the purified TAL enzyme was maximal: 0.45% for Medicago sativa. The pH and the temperature were measured by the variation of reaction medium at different temperatures and pH, the results obtained revealed that TAL is an alkaline enzyme (optimal pH 8.2) and heat-resistant (the enzyme remains active at 40°C. The enzymatic reaction was tested, in the presence of metal ions, the results revealed that FeCl3 ions as a cofactor of TAL. The reaction was also tested with the essential oils of Deverra scoparia and Salvia chudaei and the activity was increased by these HEs, which are then powerful activators of TAL. The activity of TAL was measured at different tyrosine concentrations and the results obtained were mentioned in the form of sigmoid curves which show an allosteric activity of the enzyme with an oligomeric structure. The determination of the enzymatic activity of different extracts gave different values, namely the concentration of catalytic activity (CAC), the specific activity (AS), the total activity, the enrichment and the yield

هدفنا هوالترويج لبعض النباتات العطرية من الصحراء الجزائرية وPetroselinum crispum(Apiaceae) وMentha piperita(Lamiaceae) وMedicago sativa(Fabaceae) وDeverra scoparia(Apiaceae) ، عن طريق استخراج وتقييم نشاط النبات. انزيم التيروزين الأمونيا لياز (TAL). لدراسة الإنزيمTAL، اختبرنا نشاطه باستخدام الركيزة ، أظهر هذا الاختبار نتائج إيجابية عند وجود الإنزيمTALفي المستخلصاتبحيث يخففL-tyrosine لإعطاء حمضp coumariqueتقاس كميًا بواسطة مقياس الطيف الضوئي. تم تنقية المستخلصات الخام بواسطة أيونات4MnSO,تركيز البروتينات الموجودة في المستخلصات قبل وبعد التطهير تم قياسه بواسطة طريقةBradford، التركيزات التي تم الحصول عليها في المستخلصات الخام هي الأعلى. تم إجراء اختبار أنزيمي على المستخلصات الخام والمنقحة التي كان نشاطها من إنزيمTALالمنقى أقصى:0.45٪ لـ.Medicago sativa تم قياس درجة الحموضة ودرجة الحرارة من خلال تباين وسط التفاعل في درجاتحرارة مختلفة ودرجة الحموضة ، وكشفت النتائج التي تم الحصول عليها أنTALهو إنزيم قلوي (درجة الحموضة الأمثل8.2) ومقاوم للحرارة (يبقى الإنزيم نشطًا عند40درجة مئوية. ). تم اختبار التفاعلالأنزيمي،في وجود أيوناتالمعادن،وكشفت النتائج أن أيونات3FeClكعاملمساعد فيTAL. تم اختبار التفاعل أيضً ا بالزيوت الأساسية لـDeverra scopariaوMedicago sativa، وتم زيادة النشاط بواسطة هذه المركبات ، التي كانت في ذلك الوقت منشطة قوية لـTAL. تم قياس نشاطTALبتركيزات التيروزين المختلفة وتم ذكر النتائج التي تم الحصول عليها في شكل منحنيات السيني والتي تظهر نشاط خافض للانزيم مع بنية قليل القسيم. أعطى تحديد النشاط الأنزيمي للمستخلصقيمًا مختلفة ، وهي تركيز النشاط الحفاز (CAC) ، والنشاط المحدد (AS، ) والنشاط الكلي ، والإثراء والعائد