Contribution à l’étude phytochimique, Electrochimique et biologique des extraits de Cupressus sempervirens (L)

Abstract

Notre travail porte sur l’étude des extraits de feuilles et des fruits d'une plante médicinale Cupressus sempervirens L. (Cupressaceae) cultivé dans la région de Ouargla. L’objectif du présent travail est la détermination des structures des composés isolés à partir de l’extrait d’acétate d’éthyle, ainsi que l’évaluation de l’activité biologique des extraits de cette plante. L’analyse de ces extraits a révélé la présence de quelques groupes chimiques (polyphénols, flavonoïdes, tanins, terpènes, coumarines et résines). La teneur la plus élevée en polyphénols, en flavonoïdes et en tanins a été enregistrée dans l'extrait brut pour les feuilles avec (34,34 ± 2,03 mg EAG/g MS ; 0,546 ± 0,04 mg QE / g MS et 11,02 ± 0,455 mg CE/g MS respectivement). L'activité antioxydante in vitro a été étudiée avec quatre méthodes différentes. Les résultats ont révélé que tous les extraits ont une meilleure activité réductrice de Mo (VI) à Mo (V) que le BHA avec des valeurs d'AEAC comprises entre 789,04 ± 32,47 et 28,18 ± 3,09 mM. Les valeurs de CI50 d'inhibition de DPPH• variaient de 0,011 ± 0,001 à 0,561 ± 0,042 mg/ml. Le plus grand pourcentage d'inhibition d'O_2^("•" -) a été enregistré avec l'extrait d’acétate d'éthyle des feuilles (71,163 ± 0,06 %) par la méthode d'auto-oxydation de pyrogallol, le même extrait a enregistré la plus grande activité de piégeage d’O_2^(•-) avec une valeur de CI50 égale à 0,136 mg/ml par la voltamétrie cyclique. L'extrait brut des fruits a donné la plus grande inhibition de l’-amylase avec un taux d'inhibition de 35,94%. L'inhibition de la fraction d'acétate d'éthyle d'extrait de tanins pour les feuilles est de type compétitif avec des valeurs de Ki de 1,852 μg / μl. Les différentes méthodes chromatographiques de séparation utilisées dans notre travail ont permis l’isolement de deux produits. La méthodologie de purification a été essentiellement fondée sur la combinaison de différentes méthodes chromatographiques solide-liquide sur différents supports (chromatographie sur couche mince (CCM), chromatographie sur colonne de silice, séphadex et polyamide). La détermination structurale des métabolites secondaires isolés a été réalisée grâce à l’utilisation des techniques physicochimiques et spectroscopiques incluant la spectroscopie de résonance magnétique (RMN).

یرتكز عملنا على دراسة مستخلصات أوراق و ثمارنبات طبي (Cupressaceae) Cupressus sempervirens L.)السرو (المزروع في منطقة ورقلة.الهدف من هذا العمل هو تحدید بنى مركبات معزولة من مستخلص خلاتالایثیل، بالإضافة إلى تقییم النشاط البیولوجي لمستخلصات هذه النبتة. تحلیل هذه المستخلصات أظهر وجود بعض المجموعات الكیمیائیة )متعدد الفینول، الفلافونویدات، الدباغیات، التربینات، الكومارینات و الأصماغ .(المحتوى الأعلى الفینولي، الفلافونویدي و الدباغي سجل بالمستخلص الخام للأوراق )34,342,03مغ مكافي حمض الغالیك /غ كتلة النبات الجاف، 0,546 0,04مغ مكافئ الكرسیتین /غ كتلة النبات الجاف و 0,455 11,02مغ مكافئ الكاتشین /غ كتلة النبات الجاف على الترتیب(. النشاط المضاد للأكسدةدرس مخبریا بأربعة طرق مختلفة .النتائج بینت أن كل المستخلصات تملك أعلى قدرة ارجاعیة للمولیبدان )VI(إلى المولیبدان )V(مقارنة ب BHAمع قیم AEACو التي تتراوح بین 789,0432,47 و 28,183,09میلي مولاري . قیم CI50لتثبیط جذر DPPH•ترواحت بین 0,0110,001و 0,5610,042مغ/مل . أعلى نسبة تثبیط جذر سجلت في مستخلص خلاتالایثیل للأوراق )71,1630,06%(وذلك بطر یقة الأكسدة الذاتیة للبیروغالول .نفس المستخلص سجل أعلى نشاط تثبیطي لجذر بقیمة CI50 مساویة ل 0,136مغ/مل بطریقة الفولطا متري الحلقي. المستخلص الخام للثمار أعطى أعلى نسبة تثبیط انزیم الفا -امیلاز بنسبة تثبیط 35,94%.كسر خلاتالایثیل لمستخلص الدباغیات للأوراق أظهر نوع من التثبیط التنافسي مع قیم Kiبلغت 1,852 میكروغرام/میكرولتر. سمحت طرق الفصل الكروماتوغرافیة المختلفة المستخدمة في عملنا بعزل مركبین .استندت منهجیة التنقیة أساسا على مزج الطرق الكروماتوغرافیة المختلفة )كروماتوغرافیاالطبقة الرقیقة، كروماتوغرافیا عمود السیلیكا، كروماتوغرافیا السیفادكس و متعدد الامید .( تم التحدید الهیكلي لمركبات الأیض الثانوي من خلال استخدام تقنیات فیزیوكیمیائیة وطیفیة بمافي ذلك التحلیل الطیفيبالرنین المغناطیسي النووي )RMN(. الكلمات الدالة:Cupressus sempervirens L.،الفلافونویدات،الفعالیة المضادة للأكسدة، الفولطامتري الحلقي،الفا-امیلاز.