EXPLORATION PHYTOCHIMIQUE DES EXTRAITS ANTI-NOSOCOMIAUX DE QUELQUES ASTERACEAE MEDICINALES DU SAHARA ALGERIEN

Abstract

الهدف من هذه الدراسة هو تقييم تأثيرات المضادة للميكروبات من مستخلصات النباتات الطبية التابعة للنباتات المستعملة للعلاج في جنوب غرب النجمير على سلالات المستشفيات الجرثومية والفطرية وتميز كيميائيا الأجزاء الأكثر نشاطا لتحديد جزيئاتها النشطة بيولوجيا. نفذ الاستطلاع بين خمسة مستشفيات في جنوب غرب الجزائر تقع في أربع ولايات فيما يتعلق بطرق التطهير وإعداد ومعالجة النفايات وبياضات المستشفى وتقييم الجودة الميكروبيولوجية لبيئة المستشفى، الهواء ، السطوح ، الأجهزة الطبية كشفت أن جميع هياكل المستشفيات التي تم فحصها لديها مستويات مستهدفة منخفضة للغاية و التي تضع قيمها جميع الخدمات تقريبًا في حالة تأهب وتنبيه ، حقيقة تستلزم اتخاذ إجراءات تصحيحية أنشأناها واقترحناها في هذه الدراسة. لقد عزلنا مجموعات ميكروبية مختلفة مع أعلى نسب للمكورات إيجابية الجرام بنسبة 59 ٪ والعفن بنسبة 85.72 ٪. استكشاف نقل سلالات الجنس بسودوموناس والمكورات العنقودية الذهبية لموظفي المستشفى ودراسة الخلل الوظيفي أظهر علامات تنبؤية لمقاومة الميثيسيلين في ما يخص سلالات المكورات العنقودية الذهبية المعزولة agr للمجمع الجيني كشف التحقيق في علم الأدوية العرقي عن الاستخدام الكبير للأنواع التي تنتمي لفصيلة النجميات و الشفويات ، ومن هنا كان اختيار استخدام الأجزاء الجوية من خمسة أنواع تنتمي إلى عائلة أستراسيا C. cinerea B.graveolens : ، L. arborescens ، L. nudicaulis و. W. saharae أظهرت C. cinerea أعلى معدل نشاط قدره 50.25 ٪ . أعطى حمض الهيدروكلوريك والمستخلصات المائية للأنواع التي تمت دراستها أهم النتائج ، قيمها على التوالي84.8 ٪ و 45.6 ٪. وأظهرت هذه مستخلصات تأثير مضاد للبكتيريا أكبر بكثير من تأثير مضاد للفطريات .

كان المستخلص المائي لـ C. cinerea نشطًا جدًا على سلالات المستشفيات الفطرية. تراوح الحد الأدنى من الكتلة المثبطة المستخدم ضد C. albicans من 0.65 مجم / قرص لـ C. cinerea إلى 1.5 مجم / قرص لـ L. nudicaulis و L. arboresens. يتراوح متوسط معدلات تثبيط الفطريات بين 21.27٪ و 73.53٪ على التوالي ل L. naudicaulis و C. cinerea ضد سلالات Aspergilus flavus وبين 13.71 ٪ و 73.63 ٪ ل L. arboresens و C. cinerea ضد سلالات Aspergillus niger .تركيز الحد الأدنى من الكتلة المثبطة المستخدم ضد سلالات المستشفيات من المكورات العنقودية الذهبية يتراوح بين 1.10-3 جم و5.10-4 جم.

تعرضت الكسور المنقات من المستخلصات المائية للأنواع النباتية الخمسة التي تم فحصها لتوصيف كيميائي من خلال كروماتوغرافيا الطبقة الرفيعة ، تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء ، التحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء والتحليل الطيفي للرنين المغناطيسي بروتون الرنين المغناطيسي النووي 1H و 13C الرنين المغناطيسي النووي الكربون التي أبرزت ثروة الأنواع النباتية التي تمت دراستها في الجزيئات النشطة بيولوجيا القطبية بوجود متغير λ أقصى ما بين 280 و 350 ومرات الاحتفاظ بين 6.100 و 7.61 دقيقة.

كشفت التوصيف الكيميائي لكسر نشط حيوياً تم الحصول عليه عن وجود قلويد بيروليسيدين الذي قمنا بتعيين خمسة هياكل تقدم أوجه تشابه بالنسبة للنتائج التي تم الحصول عليها لتحليل المنطق المغناطيسي 1H NMR و 13C NMR ؛ تم عزل هذا الجزيء عن المستخلص المائي لـ L. arborescens وقد ثبت أنه فعال حيويًا ضد 25923 ATCC S. aureus و ATCC C. albicans10231.

تكشف النتائج التي تم الحصول عليها عن وجود عدد كبير من الميكروبات في المستشفيات داخل المواقع والمعدات التي تم فحصها ، تتطلب تدخل سريع وفعال على مختلف المستويات. قد يكون استخدام المستخلصات المائية لأنواع النباتات التلقائية المختارة بديلاً جيدًا للتحكم من أجل تجنب الاستخدام المفرط للمنتجات المضادة للميكروبات التي يمكن أن تؤدي إلى ظهور مقاومة متعددة.

Résumé La présente étude a pour objectif d'évaluer les effets antimicrobiens des extraits de plantes médicinales appartenant à la pharmacopée du sud-ouest algérien sur des souches nosocomiales bactériennes et fongiques et de caractériser chimiquement les fractions les plus actives afin d'identifier leurs molécules bioactives. L'enquête réalisée, auprès de cinq structures hospitalières du sud-ouest algérien situées dans quatre wilayas, concernant les modalités de désinfection, de préparation et de traitements des déchets et du linge, ainsi que l’évaluation de la qualité microbiologique de l'environnement hospitalier ; air, surfaces et dispositifs médicaux, a révélé que l'ensemble des structures hospitalières investiguées présentent des taux de niveaux cible très réduit dont les valeurs mettent la quasi-totalité des services en état d'action et d'alerte, fait qui nécessite, impérativement, l'instauration d'actions correctives que nous avons établi et proposé dans la présente étude. Nous avons mis en évidence un ensemble de groupes microbiens dont les taux les plus élevés étaient représenté par les cocci Gram positif avec 59% et les moisissures avec 85,72%.

L'exploration du portage des souches du genre Pseudomonas sp et Staphylococcus aureus auprès du personnel hospitalier et celle du dysfonctionnement du complexe agr chez les souches de S. aureus isolées a mis en évidence des marqueurs prédictifs de la résistance à la méthicilline. L'enquête éthnopharmacologique à révélé l'usage considérable des espèces appartenant aux familles des Asteraceae et des lamiaceae, d'où le choix porté sur l'utilisation des parties aériennes de cinq espèces appartenant à la famille des Asteraceae: Bubonium graveolens, Cotula cinerea, Launaea arboresence Launaea nudicaulis, et Warionia saharae. C. cinerea a montré le taux d'activité le plus élevé d' une valeur de 50.25%. Les extraits HCl et aqueux des espèces étudiées ont donné les résultats les plus importants, dont les valeurs sont respectivement de 45.6% et 84,8% . Ces extraits ont montré un effet antibactérien nettement plus prononcé que l'effet antifongique.

L'extrait aqueux de C. cinerea fut très actif sur les souches fongiques nosocomiales. Les masses minimales inhibitrices évaluées contre C. albicans sont comprises entre 0.65mg/disque pour C. cinerea et 1.5mg/disque pour L. nudicaulis et L. arboresens. Les taux moyens d'inhibition fongique sont compris entre 21.27% et 73.53% respectivement pour L. naudicaulis et C. cinerea vis à vis des souches d'Aspergilus flavus et entre 13.71% et 73.63% pour L. arboresens et C. cinerea vis à vis des souches d'Aspergilus niger. Les masses minimales inhibitrices obtenues pour les souches nosocomiales de S. aureus sont comprises entre 1.10-3 g et 5.10-4 g.

Les fractions purifiées à partir des extraits aqueux des cinq espèces végétales investiguées ont fait l'objet d'une évaluation de l'effet antibactérien et antifongique, et d'une caractérisation chimique réalisée par chromatographie sur couche mince, chromatographie liquide à haute performance, analyse spectrale infrarouge et analyses spectrales de résonance magnétique RMN Proton 1H et RMN 13C qui a mis en évidence la richesse des espèces végétales étudiées en molécules bioactives polaires ayant des λ max variables entre 280 et 350 et des temps de rétention compris entre 6,100 et 7, 691min. La caractérisation chimique d'une fraction bioactive obtenue a révélé la présence d'un alcaloïde pyrrolizidinique auquel nous avons attribué cinq structures présentant des similitudes relatives aux résultats obtenus pour les analyses de résonnance magnétique RMN1H et RMN13C; Cette molécule fut isolée à partir de l'extrait aqueux de L. arborescens et s'est montrée bioactive sur S. aureus ATCC 25923 et C. albicans ATCC 10231. Les résultats obtenus laissent apparaitre une importante flore nosocomiale au sein des sites et matériaux investigués, nécessitant une intervention rapide et efficace à différents niveaux. L'utilisation des extraits aqueux des espèces végétales spontanées choisies peut constituer une bonne alternative de lutte afin d'éviter l'usage excessif des produits anti microbiens pouvant conduire à l'apparition de multi résistance.

The objective of this study is to evaluate the antimicrobial effects of medicinal plant extracts belonging to the pharmacopoeia of southwestern Algeria on bacterial and fungal nosocomial strains and to chemically characterize the most active fractions in order to identify their bioactive molecules. The survey was carried out among five hospital structures in South-West Algeria located in four wilayas concerning the methods of disinfection, preparation, and treatment of waste and linen as well as the evaluation of the microbiological quality of the hospital environment; Air, surfaces, medical devices revealed that all the investigated hospital structures have very low levels of target levels whose values put almost all services in a state of action and alertness, a fact that imperatively requires implementation of corrective actions that we have established and proposed in this study. We found a set of microbial groups with the highest rates being Gram positive cocci with 59% and mold with 85.72%. Exploration of the carriage of Pseudomonas sp and Staphylococcus aureus strains among hospital staff and of agr complex dysfunction in isolated S. aureus strains revealed predictive markers of methicillin resistance. The ethnopharmacological investigation revealed the considerable use of species belonging to the families Asteraceae and Lamiaceae, hence the choice to use the aerial parts of five species belonging to the Asteraceae family:, B. graveolens, C. cinerea, L. arboresence, L. nudicaulis, and W. saharae. C. cinerea showed the highest activity rate of 50.25%. The HCl and aqueous extracts of the species studied gave the most important results, with values of 84.8% and 45.6% respectively. These extracts showed a markedly greater antibacterial effect than the antifungal effect.

The aqueous extract of C. cinerea was very active on nosocomial fungal strains. The minimum inhibitory mass evaluated for C. albicans ranged from 0.65 mg / disc for C. cinerea to 1.5 mg / disc for L. nudicaulis and L. arboresens. The average fungal inhibition rates are between 21.27% and 73.53% respectively for L. naudicaulis and C. cinerea against strains of Aspergilus flavus and between 13.71% and 73.63% for L. arboresens and C. cinerea against strains of Aspergilus niger.The minimum inhibitory mass obtained for nosocomial strains of S. aureus between 1.10-3g and 5.10-4 g. The fractions purified from the aqueous extracts of the five plant species investigated were subjected to a chemical characterization performed by thin layer chromatography, high performance liquid chromatography, infrared spectral analysis and magnetic resonance spectral analyzes NMR proton 1H and NMR carbon 13C which has highlighted the richness of the plant species studied in polar bioactive molecules with variable λ max between 280 and 350 and retention times between 6.100 min and 7.691 min. The chemical characterization of a bioactive fraction obtained revealed the presence of a pyrrolisidine alkaloid to which we have assigned five structures presenting similarities relative to the results obtained for the analyzes of magnetic reasoning 1 H NMR and 13 H NMR; This molecule was isolated from the aqueous extract of L. arborescens and has been shown to be bioactive on S. aureus ATCC 25923 and C. albicans ATCC 10231. The results obtained reveal a large nosocomial flora within the sites and materials investigated, requiring rapid and effective intervention at different levels. The use of aqueous extracts of the selected spontaneous plant species may be a good alternative for control in order to avoid excessive use of antimicrobial products that can lead to the appearance of multi-resistance.